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    專業的報告基因檢測試劑來自Promega —— 螢光素酶檢測系統


    ★ 螢光素酶檢測系統 (Luciferase Assay System) 


    ★ Dual-Luciferase? 雙螢光素酶報告基因檢測系統 (Dual-Luciferase? Reporter Assay System)


    ★ 海腎螢光素酶檢測系統 (Renilla Luciferase Assay System )


    ★ Bright-GloTM 明亮螢光素酶檢測系統 (Bright-GloTM Luciferase Assay System)


    ★ Steady-Glo? 穩定螢光素酶檢測系統 (Steady-Glo? Luciferase Assay system )


    ★ Dual-Glo? 雙亮螢光素酶檢測系統 (Dual-Glo? Luciferase Assay System)


    ★ Chroma-GloTM螢光素酶檢測系統(Chroma-GloTMLuciferase Assay Syatem)



    點擊下載:Promega雙報告基因檢測試劑盒



    1.螢光素酶檢測系統

    產品

    包裝

    目錄號

    Luciferase Assay System

    100次檢測

    E1500

    Luciferase Assay System with Reporter Lysis Buffer

    100次檢測

    E4030

    Luciferase Assay System, 10-Pack

    1000次檢測

    E1501

    Luciferase Assay System Freezer Pack

    1000次檢測

    E4530

    Luciferase Assay Reagent

    1000次檢測

    E4550

    Reporter Lysis Buffer, 5×

    1000次檢測

    E1483

    Luciferase Cell Culture Lysis 5× Reagent

    30ml

    E1531

    Passive Lysis 5× Buffer

    30ml

    E1941

    Reporter Lysis 5× Buffer

    30ml

    E3971

    描述:

            普洛麥格公司的螢光素酶檢測系統可以非常靈敏快速地定量檢測螢火蟲螢光素酶(1-4)??稍谥辽?個數量級的酶濃度范圍內得到線性結果。獲專利的試劑配方可在最佳條件下測量少于10-20 摩爾的螢火蟲螢光素酶(1)。一般情況下,靈敏度高于氯霉素轉乙?;?(CAT)檢測100倍(5)。這個試劑產生的螢光可穩定至少一分鐘,可配合單管螢光發光計或具有自動注射器的多孔螢光發光計測量螢火蟲螢光素酶的活性

            普洛麥格公司的螢光素酶檢測系統是非均質檢測系統;即:在加入試劑之前,含有螢光素酶的細胞必須被裂解。閃亮裂解緩沖液(目錄號E2661),細胞裂解試劑 (目錄號 E1531)和報告基因裂解緩沖液(目錄號 E3971)可與螢光素酶檢測系統一起定量檢測哺乳動物細胞中的螢光素酶。螢光素酶檢測系統也可用于植物和細菌細胞的定量檢測,但報告基因裂解緩沖液(目錄號 E3971)不適于這些應用。然而,應用報告基因裂解緩沖液(目錄號 E3971)允許使用同一細胞裂解液進行螢火蟲螢光素酶、CAT 和β-半乳糖苷酶等多項檢測(6)。有些試劑盒包括裂解液,而有些試劑盒須單買裂解液。

    特點:

    ● 線性:超過至少8個酶濃度數量級。
    ● 靈敏:少至10-20 摩爾的螢光素酶可被檢測。
    ● 快速:5分鐘完成細胞裂解,樣品制備和檢測。
    ● 方便:報告基因裂解緩沖液(目錄號 E3971)允許在 同一細胞裂解液中進行螢火蟲螢光素酶、CAT和 β-galactosidase等多項檢測。
    ● 樣品檢測步驟簡單:不需自動注射裝備,不需快速混 合操作。
    ● 耐用:推薦使用螢光發光計,但也適用于閃爍計數器。
    ● 安全:非放射性。
    ● 優越:優越于其他公司的螢光素酶檢測試劑



    2.Dual-Luciferase? 雙螢光素酶報告基因檢測系統

    產品

    包裝

    目錄號

    Dual-Luciferase? Reporter Assay System

    100次檢測

    E1910

    Dual-Luciferase? Reporter Assay System 10-pack

    1000次檢測

    E1960

    Dual-Luciferase? Reporter 1,000 Assay System

    1000次檢測

    E1980

    Passive Lysis 5× Buffer

    30ml

    E1941

    描述:

            普洛麥格公司的雙螢光素酶報告基因(DLRTM)檢測系統為雙報告基因檢測提供有效手段。在DLR TM檢測中, 螢火蟲(Photinus pyralis)螢光素酶和海腎(Renilla reniformis)螢光素酶可在單個樣品中連續測量。測量過程是:加入螢光素酶檢測試劑II (LARII)產生螢火蟲螢光信號,信號持續至少1 分鐘,這樣先測量螢火蟲螢光素酶報告基因。定量螢火蟲螢光強度之后,再在同一樣品中加入Stop & Glo? 試劑,將上述反應猝滅,并同時啟動海腎螢光素酶反應, 同時進行第二次測量。如果使用帶有試劑自動注射器的螢光發光計,兩個檢測可在4 秒內完成。在DLRTM檢測系統中, 兩個報告基因產生的線性檢測范圍均在小于10-18 摩爾的靈敏度范圍內, 兩個報告基因在實驗宿主細胞內均無內源活性。另外,此系統中一體化形式的雙螢光素酶檢測既可快速定量檢測轉染細胞,也可用于快速定量檢測無細胞轉錄/翻譯反應體系中的兩個報告基因。

            普洛麥格公司的合成海腎基因phRL系列:普洛麥格公司曾為雙螢光素酶報告基因(DLRTM )檢測系統設計了螢火蟲螢光素酶報告基因載體和野生型海腎報告基因載體 pRL系列。phRL和pRL系列載體均提供海腎螢光素酶的組成性表達,可與任何實驗用螢火蟲螢光素酶載體組合,共同轉染哺乳動物細胞。

            有關目錄號E1960 和 E1980 產品的通知:已提供足夠的被動裂解液進行96孔板細胞的1000次檢測 (每孔用20ul的1x被動裂解液PLB)。若需更多的裂解試劑(如 >100ul/孔),可單獨購買被動裂解液 (PLB)。



    特點:

    ● 更精確: 使用海腎螢光素酶作內對照可得到更精確 的結果。
    ● 方便:不需分開樣品,節省平板和時間。
    ● 靈敏:可研究弱啟動子,低表達/調控, 及轉染差的 細胞的表達。
    ● 線性:范圍至7個數量級,活性很高的樣品一般不需 稀釋



    3.海腎螢光素酶檢測系統

    產品

    包裝

    目錄號

    Renilla Luciferase Assay System

    100次

    E2810

    1,000次

    E2820

    描述:

            普洛麥格公司的海腎螢光素酶檢測系統設計了快速靈敏的方法,檢測來自海洋動物海腎(Renilla reniformis)的螢光素酶。這些系統可方便地替代螢火蟲 (Photinus pyralis) 報告基因系統,得到可靠的、線性范圍超過7個數量級酶濃度的結果。與其它試劑相比,獲得專利的海腎螢光素酶檢測系統組分配方顯著降低了腔腸素( coelenterazine) 的自發螢光影響,比已發表的方法靈敏度高幾個數量級。這些系統可測量野生型的或合成的hRluc基因作為主要表達基因,或作為內標測量基因的表達。海腎螢光素酶檢測系統包括海腎裂解液,海腎螢光素酶檢測緩沖液和海腎螢光素酶檢測底物。

    特點:

    ● 降低的自發螢光:低背景,高靈敏度
    ● 靈敏度:可檢測10-19摩爾的海腎螢光素酶
    ● 線性:線性范圍超過7個數量級
    ● 獨特:第一個, 也是唯一的海腎螢光素酶檢測試劑盒



    4.Bright-GloTM明亮螢光素酶檢測系統

    產品

    包裝

    目錄號

    Bright-GloTM Luciferase Assay System

    10 ml

    E2610

    10 x 100 ml

    E2650

    100 ml

    E2620

    描述:

          在哺乳動物細胞中超高通量定量螢火蟲螢光素酶的表達,需要高靈敏度并適應連續的自動化系統的試劑。普洛麥格公司的Bright-GloTM明亮螢光素酶檢測系統專為連續過程系統設計,提供通用、均質的檢測化學,獲得了高檢測靈敏度,和約半小時的信號半衰期,同時無須預先處理樣品。這樣,滿足了科學家想使用較少量樣品卻仍然獲得高靈敏度, 而且易于操作的需求。


    特點:

    ● 快速:加入檢測試劑前不須去除培養基或洗滌細胞。 可直接在培養細胞的多孔板上進行檢測。 
    ● 靈敏:產生比其它均質螢光素酶檢測試劑高至10倍 的光強度,從而提高了靈敏度。 
    ● 更高的精確度:對混合程度,樣品蒸發和加樣誤差不 很敏感,從而提高了數據可重復能力。 
    ● 方便:只須簡單將緩沖液與凍干粉底物混合,加入到 含細胞的培養基中。使用前不須融化,不須測量,不 須平衡溫度



    5.穩定螢光素酶檢測系統

    產品

    包裝

    目錄號

    Steady-Glo? Luciferase Assay system

    10 ml

    E2510

    100ml

    E2520

    10x100ml

    E2550

    描述:

          普洛麥格公司的Steady-Glo? Luciferase Assay system為高通量定量在哺乳動物細胞中的螢光素酶表達而設計,將其加入到培養細胞中會產生長效螢光,一般用于批量處理96和384孔板樣品。這個均質檢測系統不需樣品預處理,在常用細胞培養基中信號半衰期可達5小時以上。在標準實驗室條件下,通量效率可達每小時幾千樣品,并且結果重復率高。

    特點:

    ● 更大的發光量:因此具有比其它長發光時間的螢光 素酶檢測試劑更高的靈敏度。 
    ● 更好的檢測精確度:對混合條件不甚敏感,使得多孔 檢測重復性更好。這在 384孔板上尤為有用。
    ● 方便:簡單將凍干粉底物與緩沖液混合就可使用;使 用前不須融化、測量或溫度平衡過程。 
    ● 快速:在加入檢測試劑前不需去掉培養基或洗滌細 胞??稍谕欢嗫装迳吓囵B細胞并進行檢測。 
    ● 易于使用:只要加入試劑,試劑中含有裂解細胞的成 分,等待5分鐘,然后即可測量螢光。 
    ● 通用:與許多組織培養基相容,包括那些含10%以 下血清的培養基



    6.Dual-GloTM雙亮螢光素酶檢測系統

    產品

    包裝

    目錄號

    Dual-GloTM LuciferaseAssay System

    10 ml

    E2920

    100 ml

    E2940

    10×100 ml

    E2980

    描述:

          雙亮螢光素酶檢測系統是均質試劑系統,可高通量定量穩定螢光,從一個樣品中同時檢測兩個螢光素酶報告基因。這個簡單的加樣-讀數系統可從未預處理或未預裂解的細胞中產生螢火蟲和海腎螢光素酶的螢光信號。在雙亮螢光素酶檢測中,主要報告基因的活性與特異刺激效果有關,而作為內對照的共轉染輔助報告基因的活性可使檢測結果正態化。使用雙亮螢光素酶檢測系統,可建立內對照使樣品間的差異最小化,并減小非特異性因子導致的錯誤讀數。此系統為處理96-和384- 孔板的樣品而優化,與大多數哺乳動物細胞培養基兼容。


    特點:

    ● 更高的精確度和準確度:使用內對照使主要報告基 因的結果正態化。輔助報告基因的作用使細胞數, 細 胞健康程度,轉染效率和非特異性細胞反應的影響效 果降到最小。 
    ● 均質配方:操作步驟較少??稍谏L培養基上直接檢 測細胞中的兩個報告基因。無需離心。 
    ● 穩定的信號:靈活處理96-,384- 和 1536-孔板的 批量或連續樣品。加入試劑后2小時內測量兩種螢光 均有效。
    ● 方便:簡單、兩步檢測的方法篩選效率高,適用于任 何螢光發光計。不需進樣器。
    ● 范圍廣:不需稀釋樣品即可分析高活性或低活性的報 告基因。每個報告基因的酶濃度線形范圍至少超過6 個數量級



    7.Chroma-GloTM螢光素酶檢測系統

    產品

    包裝

    目錄號

    Chroma-GloTMLuciferase Assay Syatem

    10ml

    E4910

    100ml

    E4920

    10X100ml

    E4950

    描述:

          Chroma-GloTM螢光素酶檢測系統和Chroma-LucTM系列載體結合使用,可以從一份樣品中產生紅色和綠色兩種(雙色)螢光,而只需加入一種試劑。每一個Chroma-LucTM螢光素酶產生的雙色螢光之一經過過濾,可以使每個報告基因獨立并幾乎同時被測量。Chroma-GloTM檢測是一種均質配方,每一個Chroma-LucTM螢光素酶產生的信號半衰期大于30分鐘,因此可以處理許多平板而不需樣品前處理過程。使用高度同源的Chroma-LucTM螢光素酶建立理想的內部對照,可以在研究細胞毒性的負調節時使結果歸一化,也可減小樣品內和樣品間的數據變化。還可以在細胞水平的檢測中,使用兩個報告基因進行多重報告基因實驗,以增加數據內容。

    特點:

    ● 加入一個底物,測量雙報告基因:通過數據歸一提高精確度和準確度,或使用兩個報告基因于多重實驗測量。用濾光片在光譜上分開不同的螢光信號。
    ● 建立理想的對照或多重系統:使用高度同源的紅色和綠色熒光素酶來減少可能的RNA 和蛋白質對報告基因表達的影響。
    ● 提高通量:批量或多個平板的連續處理,螢光穩定。
    ● 較少操作步驟:在有培養基的細胞中直接加入單一體積的Chroma-LucTM 試劑后就可測量




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