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    正確打開MSC培養方式:MSC NutriStem無血清系列產品



    1.MSC Nutristem XF + PLTGold


    長久以來,我們都知道當組織受傷的時候,血小板會很快地聚集在傷口附近形成血液凝塊,堵住傷口,發揮止血的功能。然而,近年來
    許多的研究證實,血小板還具備另一重要功能–幫助我們調節體內的新陳代謝,促進組織的修復與愈合。

    血小板:我不只有止血功能噢!

    血小板是一種叫做巨核細胞(Megakaryocyte)的細胞質小碎片彼此黏附在一起所形成的,壽命約7~14天,每天約更新總量的1/10。
    雖然血小板沒有細胞核,但含有來源于巨核細胞的mRNA,能轉錄并獨立進行蛋白合成;在正常的狀態下,血小板外形像平滑的小圓
    盤(下圖左);被激活時,外形就變成了海膽的樣子,上面長滿了很多突起小刺(下圖右),這時候血小板內部的誘導物質會因血小
    板活化而被釋放出來,開始刺激微血管生長、促進傷口愈合,這些物質就是所謂的生長因子(如PDGF,TGF-β,VEGF,EGF和IGF等)。


    https://img1.dxycdn.com/2019/0926/881/3370457926824569908-14.jpg??????? https://img1.dxycdn.com/2019/0926/553/3370458029903787186-14.jpg
    平滑的小圓盤(未活化)▲?????????????? ???????海膽狀血小板(已活化)▲


    血小板跟間充質干細胞培養有什么關系?

    近年來,許多學者針對干細胞(Stem Cells)做深入的研究,證實了多種干細胞的細胞膜上,有上述生長因子的接受體,當這些生長因子和干細胞的細胞膜上的接受體結合后,會啟動細胞內的信號傳導途徑,引起基因序列的表達,誘導mRNA轉錄,進而合成各種蛋白,促進干細胞增殖。而間充質干細胞在人體組織中比例較低,若要達到臨床治療所需細胞數量,就必須要進行體外大規模擴增,而血小板會釋放生長因子的特性,能完美的幫助我們完成這個任務。

    如何從血液中取到足夠的血小板呢?

    想要搜集足夠的血小板,最簡單的方式就是制備“富血小板血漿(Platelet Rich Plasma,PRP)”,就是將全血通過梯度離心后而得到的血液制品,換句話說就是血小板的濃縮物(血小板濃度由20萬顆/ml,提升到100萬顆/ml),但其中依然含有大量細胞碎屑,若直接應用在細胞培養中會有較強的免疫原性,因此誕生了PLTGold?人源血小板裂解物(Human Platelet Lysate,HPL)這個新一代富血小板生長因子細胞培養添加劑。

    什么是血小板裂解物?

    前述所說的生長因子大多存在于血小板內部的α顆粒中,當血小板被活化后會產生脫顆粒作用(即血小板的α顆粒會和細胞膜融合),進而釋放大量活化的生長因子。而PLTGold?人源血小板裂解物就是直接將人類來源血小板細胞經過連續的反復凍融裂解后,進一步提純這些血小板脫顆粒的商品;PLTGold?人源血小板裂解物除了擁有比富血小板血漿更高的生長因子濃度,更用特殊工藝去除了細胞碎片,大幅降低了使用過程中的免疫原性。

    PLTGold?人源血小板裂解物怎么使用?

    PLTGold?人源血小板裂解物的使用方式非常方便簡單,在培養基中(如 a-MEM培養基,BI:01-042-1ACS)添加5%血小板裂解物,混合均勻后即可直接用來培養間充質干細胞,且在傳代過程中不需要預包被培養皿。適合應用在多種來源的間充質原代干細胞培養過程呦!


    https://img1.dxycdn.com/2019/0926/769/3370458422893302743-14.jpg
     ▲ 添加PLTGold?人源血小板裂解物(綠色)的細胞增殖速度,明顯大于添加胎牛血清(黃色)或添加AB血清(紅色)的實驗組。


    *BI 真心推薦,以NutriStem? 間充質干細胞無血清培養基搭配PLTGold?人源血小板裂解物使用,間充質干細胞增殖效果更佳。

    ●優質的血清替代物

    ●不含肝素或抗凝血劑

    ●富含貼壁因子,不需包被培養耗材

    ●有效培養多種來源的MSC,且適用于MSC無血清體系

    ●適用于培養造血干細胞、iPSC和iPSC衍生細胞、胚胎干細胞、成纖維細胞、內皮細胞、腫瘤細胞等


    https://img1.dxycdn.com/2019/0926/759/3370458562479821600-14.jpg
    ▲ PLTGold?人源血小板裂解物搭配BI NutriStem?間充質干細胞完全培養基使用(基礎培養基+培養基添加劑,綠色),細胞增殖效果
    明顯大于(復蘇后第四代細胞數可相差至70倍)搭配BI NutriStem?間充質干細胞基礎培養基(僅含基礎培養基,藍色)或搭配一般a-MEM
    培養基(灰色)。


    2. Recombinant Trypsin EDTA Solution 重組胰酶


    重組胰蛋白酶EDTA解決方案是一種定義明確的無動物成分的解決方案,旨在有效地從培養表面和組織中解離粘附細胞類型。EDTA組分加速胰蛋白酶的解離作用。該解決方案針對敏感細胞(例如原代人間充質干細胞(hMSC))進行了優化。


    ●不含動物成分的已定義
    ●即用型解決方案
    ●加速酶促作用
    ●重組胰蛋白酶-無污染蛋白酶
    ●針對MSC等敏感細胞進行了優化
    ●與在無血清和含血清的培養基中培養的細胞兼容



    3. D10無血清凍存液

    NutriFreez?D10冷凍保存培養基是一種即用型,無動物成分,無血清和無蛋白質的細胞冷凍溶液,已針對多種細胞系進行了優化。在
    無血清環境中培養細胞時,在冷凍保存過程中也必須保持無血清條件。  
    已證明NutriFreez?D10冷凍保存培養基在冷凍和解凍后可獲得較高的細胞存活率,增殖,粘附(在相關系中)以及生物活性/表達。與
    含血清的冷凍培養基以及競爭的無血清產品相比,均獲得了優異的結果,這使其成為含血清和無血清應用的理想產品。
    與含血清凍存體系可無縫銜接,提高細胞存活率,增強細胞活性
    即用型,只需沉淀細胞并重懸在凍存液中即可。無需添加其他組分。
    通用型凍存液,適合各種干細胞,珍貴細胞,單細胞等

    NutriFreez?D10培養基已成功用于許多細胞類型,包括但不限于:人間充質干細胞(hMSC)來自各種來源骨髓(BM-MSC),脂肪組
    織(AT-MSC),臍帶組織(UC -MSC)和牙髓組織(DP-hMSC)
    人類胚胎干細胞(hESC),誘導多能干細胞(iPSC),
    人類外周血單核細胞(PBMC),人類內皮細胞(EC),
    T細胞,包括嵌合抗原受體(CAR-T)細胞和腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL),
    神經元,星形膠質細胞,雜交瘤,CHO細胞,Vero細胞
    多種哺乳動物細胞系,包括:MRC-5,HEK-293,HepG2,HeLa,BSC -1,BGM,3T3,MA-10,BHK-21以及其他極其敏感的細胞類型

    特點

    ●防凍配方,旨在最大程度降低脫水效果
    ●有效維持細胞活力,重貼壁和生物活性
    ●保持干細胞多能性,正常的核型,和解凍后的增殖力
    ●即用型解決方案,操作簡單
    ●無動物成分,無血清,無蛋白質的溶液
    ●適合臨床樣本? 已取得FDA獲批DMF

    *NutriFreez?是根據cGMP和美國FDA IVD部分864.9225生產的,用于體外診斷的細胞冷凍設備和試劑。它在歐洲列為CE IVD I類,因
    此符合根據ISO 13485 QMS制造并符合適用的cGMP準則的歐洲體外診斷設備指令(98/79 / EC)的要求。


    4.MSC分化:MSCgo?成骨/成脂/成軟骨誘導分化試劑

    MSCgo?成骨誘導分化試劑
    MSCgo? Osteogenic Differentiation Medium間質干細胞成骨誘導分化培養基,無血清,無異源,即用型完全培養基,誘導hMSC分化為
    成熟成骨細胞。適用于不同來源的hMSC,如骨髓、脂肪組織和臍帶組織(hMSC-BM,hMSC-AT,hMSC-CT)。
    MSCgo? Rapid Osteogenic Differentiation Medium 10天以內快速誘導成骨,而MSCgo? Osteogenic Differentiation Medium需
    要14-21天。
    成骨結果
    hMSC分化成骨后會礦化形成鈣結節且有鈣分泌,所以可以利用茜素紅S (Alizarin Red S) 染色檢視分化的成骨細胞。不同的細胞來
    源(類型、年齡、代數)所得到的分化效果會有差異

    MSCgo?成脂誘導分化試劑
    MSCgo?Adipogenic Differentiation Medium間充質干細胞成脂誘導分化培養基,無血清,無異源成分,即用型,適用于不同來源
    的hMSC,如骨髓、脂肪組織和臍帶組織(hMSC-BM,hMSC-AT,hMSC-CT)。
    成脂分化后的hMSC會成球狀,并且伴隨有脂滴累積,該現象可透過倒置顯微鏡觀察。不同的細胞來源 (類型、年齡、代數)所
    得到的分化細胞數會有差異。

    MSCgo?成軟骨誘導分化試劑

    MSCgo? Chondrogenic Differentiation Medium間質干細胞成軟骨誘導分化培養基,無血清,無異源成分,即用型,適用于不同來
    源的hMSC,如骨髓、脂肪組織和臍帶組織(hMSC-BM,hMSC-AT,hMSC-CT)。
     hMSC成軟骨分化,細胞會聚集形成3D球狀,同時伴隨細胞外基質有蛋白聚糖 (Aggrecan) 富集的情形。所以可用Alcian Blue(深藍
    色的含銅染料)染色檢驗蛋白聚糖,作為成熟軟骨形成的指標。不過染色的強度會因不同hMSC來源(類型、年齡、代數)而有差異。


    5.MSC染色鑒定:

    特別針對MSC分化培養后驗證而設計。染色能力強,效果穩定。從固定、染色、漂洗到拍照,均無需另購其他試劑即可完成,使用方便


    C37C00150

    MSC成骨分化染色試劑盒? 茜素紅原理

    C37A00150

    MSC成脂分化染色試劑盒? 油紅O原理

    C37B00150

    MSC成軟骨分化染色試劑盒? 阿爾新藍

    NutriStem干細胞無血清系列產品:


    03-073-1B

    Accutase
    細胞消化液

    100ml

    -20oC

    03-078-1B

    Recombinant Trypsin Solution 
    重組胰酶(不含EDTA)

    100ml

    AMB

    03-079-1A

    Recombinant Trypsin EDTA Solution 
    重組胰酶 (含EDTA)

    500ml

    AMB

    03-079-1B

    Recombinant Trypsin EDTA Solution 
    重組胰酶 (含EDTA)

    100ml

    AMB

    03-048-1C

    Soybean Trypsin Inhibitor 50X Conc., 5mg/ml
    大豆胰蛋白酶抑制劑

    20ml

    -20oC

    05-100-1A

    NutriStem? hPSC XF Medium
    多能干細胞無血清培養基

    500ml

    -20oC

    05-100-1B

    NutriStem? hPSC XF Medium
    多能干細胞無血清培養基

    100ml

    -20oC

    06-5100-01-1A

    NutriStem hPSC XF Medium W/O TGF & FGF
    多能干細胞無血清培養基(不含 TGF & FGF)

    500ml

    -20oC

    05-753-1F

    LaminStem? 521
    重組層粘連蛋白

    1ml

    -20oC

    05-105-1A

    NutriStem? V9 XF Basal Medium
    多能干細胞V9無血清基礎培養基

    500ml

    -20oC

    05-106-1F

    NutriStem? V9 XF Suppl. Mix
    多能干細胞V9無血清添加物

    1ml

    -20oC

    05-754-0002

    Vitronectin ACF
    無血清玻連蛋白

    200μg

    -20oC

    01-862-1B

    0.5M EDTA solution
    EDTA溶液

    100ml

    AMB

    05-202-1A

    Nutristem MSC XF Basal Medium without Phenol Red
    間充質干細胞無血清基礎培養基(無酚紅)

    500ml

    4oC

    05-200-1A

    Nutristem MSC XF Basal Medium
    間充質干細胞無血清基礎培養基

    500ml

    4oC

    05-200-1A

    Nutristem MSC XF Basal Medium
    間充質干細胞無血清基礎培養基

    500ml

    4oC

    05-201-1U

    Nutristem MSC XF Supplement Mix
    間充質干細胞無血清營養添加物

    1x3ml

    -20oC

    05-752-105

    MSC Attachment Solution
    間充質干細胞促貼壁試劑(無動物源成分)

    0.5ml

    4oC

    05-752-1F

    MSC Attachment Solution
    間充質干細胞促貼壁試劑(無動物源成分)

    1ml

    4oC

    05-760-1-15

    NutriCoat? Attachment Solution
    NutriCoat MSC促貼壁試劑

    1.5ml

    AMB

    05-200-1B

    Nutristem MSC XF Basal Medium
    間充質干細胞無血清基礎培養基

    100ml

    4oC

    05-201-106

    Nutristem MSC XF Supplement Mix
    間充質干細胞無血清營養添加物

    1x0.6ml

    -20oC

    PLTGOLD500R

    PLTGold? Human Platelet Lysate
    血小板裂解物

    500ml

    -20oC

    PLTGOLD100R

    PLTGold? Human Platelet Lysate
    血小板裂解物

    100ml

    -20oC

    PLTGOLD050R

    PLTGold? Human Platelet Lysate
    血小板裂解物

    50ml

    -20oC

    PLTGOLD010R

    PLTGold? Human Platelet Lysate
    血小板裂解物

    10ml

    -20oC

    PLTGOLD005R

    PLTGold? Human Platelet Lysate
    血小板裂解物

    5ml

    -20oC

    PLTGOLD002R

    PLTGold? Human Platelet Lysate
    血小板裂解物

    2ml

    -20oC

    PLTGOLD500RGMP

    PLTGold? Human Platelet Lysate(Clinical Grade)
    血小板裂解物(臨床級)

    500ml

    -20oC

    PLTGOLD100RGMP

    PLTGold? Human Platelet Lysate(Clinical Grade)
    血小板裂解物(臨床級)

    100ml

    -20oC

    PLTGOLD050RGMP

    PLTGold? Human Platelet Lysate(Clinical Grade)
    血小板裂解物(臨床級)

    50ml

    -20oC

    C35010100

    MSC ACF Tissue Digestive Mix
    AF高效原代干細胞分離液

    100ml

    -20oC

    C35010020

    MSC ACF Tissue Digestive Mix
    AF高效原代干細胞分離液

    20ml

    -20oC

    C35010010

    MSC ACF Tissue Digestive Mix
    AF高效原代干細胞分離液

    10ml

    -20oC

    05-713-1A

    NutriFreez? D10 Cryopreservation Medium
    NutriFreez? D10無血清凍存液(無動物源成分)

    500ml

    4oC

    05-713-1B

    NutriFreez? D10 Cryopreservation Medium
    NutriFreez? D10無血清凍存液(無動物源成分)

    100ml

    4oC

    05-713-1E

    NutriFreez? D10 Cryopreservation Medium
    NutriFreez? D10無血清凍存液(無動物源成分)

    50ml

    4oC

    05-714-1A

    NutriFreez? D10 Cryopreservation Medium,? w/o phenol-red
    NutriFreez? D10無血清凍存液(無動物源成分,無酚紅)

    500ml

    4oC

    05-714-1B

    NutriFreez? D10 Cryopreservation Medium,? w/o phenol-red
    NutriFreez? D10無血清凍存液(無動物源成分,無酚紅)

    100ml

    4oC

    05-714-1E

    NutriFreez? D10 Cryopreservation Medium,? w/o phenol-red
    NutriFreez? D10無血清凍存液(無動物源成分,無酚紅)

    50ml

    4oC

    05-752-1H

    MSC Attachment Solution
    間充質干細胞促貼壁試劑(無動物源成分)

    5ml

    4oC

    05-220-1B

    MSCgo? Chondrogenic Differentiation Basal Medium
    間充質干細胞成軟骨誘導分化基礎培養基

    100ml

    4oC

    05-221-1D

    MSCgo? Chondrogenic Differentiation Supplement Mix
    間充質干細胞成軟骨誘導分化營養添加物

    10ml

    -20oC

    05-330-1B

    MSCgo? Adipogenic Differentiation Basal Medium
    間充質干細胞成脂誘導分化基礎培養基

    100ml

    4oC

    05-331-1-01

    MSCgo? Adipogenic SF,XF Supplement Mix I
    間充質干細胞成脂誘導分化營養添加物I

    0.1ml

    -20oC

    05-332-1-15

    MSCgo? Adipogenic SF,XF Supplement Mix II
    間充質干細胞成脂誘導分化營養添加物II

    1.5ml

    -20oC

    05-440-1B

    MSCgo? Osteogenic Differentiation Medium
    間充質干細胞成骨誘導分化試劑

    100ml

    4oC

    05-442-1B

    MSCgo? Rapid Osteogenic Differentiation Medium
    間充質干細胞成骨快速誘導分化試劑

    100ml

    4oC

    C37A00150

    Adipo-dye for adipocytes staining kit in adipogenic differentiation
    間充質干細胞成脂分化染色試劑盒

    150ml

    4oC

    C37B00150

    Chondro-dye for chondrocytes staining kit in chondrogenic differentiation?
    間充質干細胞成軟骨分化染色試劑盒

    150ml

    4oC

    C37C00150

    Osteo-dye for osteocytes staining kit in osteogenic differentiation
    間充質干細胞成骨分化染色試劑盒

    150ml

    4oC

    05-400-1A

    EndoGo XF Basel Medium
    內皮細胞無血清基礎培養基

    500ml

    4oC

    05-410-1-25

    EndoGo XF Supplement  Mix
    內皮細胞無血清添加劑

    2.5ml

    -20oC


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